Tubo de extracción de mojonnier

Determinación de proteínas

Todos los alimentos naturales contienen proteína; la proteína o más bien la proteína cruda de los alimentos, se calcula en base al nitrógeno total que es estimado generalmente por el método de digestión de Kjeldahl.

El contenido de proteínas diferentes es casi semejante y aproximado al 16 % ; por consiguiente multiplicando el nitrógeno estimado por el factor de 6.25 se obtiene el total de proteínas.

En algunos alimentos es alto el nitrógeno no proteínico y se usan otros factores para convertir el nitrógeno en proteína cruda; estos factores se basan en el análisis detallado del contenido promedio de nitrógeno en las proteínas contenidas en ciertos alimentos en particular. Debido a esto es conveniente citar el factor usado al informar el contenido de proteínas.

Fundamento

Las proteínas y demás materias orgánicas son oxidad as por el ácido sulfúrico y el nitrógeno orgánico de las proteínas se fija como sulfato de amonio.

Esta sal se hace reaccionar con una base fuerte para desprender amoniaco, que se destila y se recibe en un ácido débil, en el cual se puede titular el amoniaco con un ácido fuerte. En este método de Kjeldahl Gunning, s e usa el sulfato de cobre como catalizador y el sulfato de sodio para aumentar la temperatura de la mezcla y acelerar la digestión.

Material

– Matraz de Kjeldahl de 800 mI -Matraz Erlenmeyer de 500 ml
– Bureta de 50 ml. graduada en décimas -Cuerpos de ebullición
– Balanza analítica con sensibilidad de 0.1 mg -Digestor-Destilador de Kjeldahl

Reactivos

– Ácido sulfúrico, Grado reactivo -Sulfato de cobre, Grado reactivo -Granalla de Zinc, Grado reactivo
– Sulfato de sodio anhidro, Grado reactivo -Ácido bórico al 4% en agua
– Solución de hidróxido de sodio 1:1 m/v, Grado reactivo – Ácido clorhídrico 0.1 N
– Indicador de Wesslow.-Rojo de metilo al 0.2 % en una mezcla de 60 ml de etanol y 40 ml de agua
– Azul de metileno al 0.2% en agua. Mezclar 2 partes de rojo de metilo con 1 parte de azul de metileno.

Procedimiento

Pesar 2g de muestra finamente molida (puede utilizarse papel filtro pasa pesar sin ninguna interferencia) y pasar a un matraz de Kjeldahl, agregar 2g de sulfato de cobre, 10g de sulfato de sodio anhidro, 25ml de ácido su Ifúrico y unos cuerpos de ebullición. Colocar el matraz en el digestor y calentar cuidadosamente a baja temperatura hasta que todo el material esté carbonizado y aumentar gradualmente la temperatura hasta que el contenido del matraz esté completamente claro, calentar por 30 minutos más.

Dejar enfriar y agregar 400ml de agua destilada para disolver completamente el residuo del matraz; dejar enfriar.

Medir aproximadamente 50 ml. de ácido bórico en un matraz erlenmeyer de 500 ml, agregar unas gotas del indicador de Wesslow y recibir el destilado en esta solución, cuidando que la parte terminal del tubo del destilador quede sumergido dentro del ácido (consultar figura).

Agregar al matraz de Kjeldahl frío de 6 a 7 granallas de zinc y estratificando y sin agitar 50 ml. de solución de hidróxido de sodio. Conectar el matraz al destilador y destilar hasta recolectar 300 ml, retirar el matraz y titular con ácido clorhídrico 0.1 N.

Calculos

En donde:

V = ml de ácido clorhídrico 0.1 N requeridos en la titulación N= Normalidad del ácido clorhídrico 0.1 N
PM = Peso de la muestra en gramos 0.014= Mili equivalente del nitrógeno
F = Factor (anexo 1) para convertir nitrógeno a proteínas

Fuente: Apuntes de Taller de Frutas y Hortalizas de la UNIDEG